做实验的小伙伴，是不是经常被“检出限"、“定量限"这些概念搞得头晕眼花？一份数据可不可靠，方法的灵敏度是关键。这篇文章，上海析谱仪器有限公司专业工程师带来干货满满的实操指南；帮你搞定分光光度法中检出限的测定。

                     TU-1810紫外可见分光光度计

 1.什么是检出限

 简单来说，检出限就是你的仪器和方法能够“有把握地"检测出待测物质的小浓度。

请注意关键词：“有把握地"——它不是说仪器指针动了一下就算检出，而是指测出的信号能明确地区分于空白溶液的背景噪音，并且有足够的置信度（通常是99%的置信水平）。

 为什么它重要？评价方法性能：检出限是衡量分析方法灵敏度的核心指标之一。数值越低，方法越灵敏。判断数据可靠性：当样品浓度低于检出范围，你的检测结果应报告为“未检出"（ND），而不是一个具体的数值，否则会误导他人。满足标准要求：很多行业标准和论文投稿都要求提供方法的检出限。

 2.三步算出检出限

 国际上zui常用、也最规范的方法是 “空白标准偏差法"。别怕，公式很简单，我们一步步来。

 第1步：准备空白溶液

 这里的“空白"指的是不含待测物质，但经历了全部实验流程的溶液。比如，你用某种试剂处理样品，那么空白溶液就应该加入等量的试剂，并经过同样的加热、定容等步骤。关键：空白必须真实反映整个分析过程带来的背景干扰。

 第2步：连续测定空白信号

 用上海析谱制造的紫外可见分光光度计TU1810，连续测定空白溶液的吸光度（OD值或吸光度A）至少10次（建议11-20次，次数越多统计结果越可靠）。记录下每一次的测量值。

操作提示：

※ 保持仪器稳定。

※ 每次测量前，都用同一个空白溶液冲洗比色皿。

※ 记录数据要准确。

 第3步：计算与结果

 现在轮到数学时间了，只需两个公式：

 1、计算空白信号的标准偏差（SD）

 把你测到的所有空白信号值（比如11个吸光度值）输入计算器或Excel，直接使用 STDEV.S 函数计算标准偏差。我们记这个结果为SDₕ（空白标准偏差）。

 2、套用公式，计算检出限（LOD）

 公式：LOD = 3 × SDₕ / b

 这个“3"就是统计学上99%置信度的系数，意味着信号强度是空白波动范围的3倍时，我们才敢说“真的测到了"。

注意：上面的LOD是以吸光度（A）为单位的，我们最终需要的是浓度！

 3、将检出限转换为浓度单位

 你需要知道方法的灵敏度，也就是标准曲线的斜率（b）。假设你的标准曲线回归方程是

 A =a + b×C（C是浓度），那么斜率就是b。

 最终浓度检出限（LOD₍c₎） = 3×SDₕ / b